La Interleucina 2 (IL-2) es una importante citocina inmunorreguladora, que actúa sobre linfocitos T, B, Células NK y macrófagos entre otras. Su acción es mediada por la unión no covalente de ésta a su receptor (RIL-2). Debidoa a su acción inmunorreguladora ha sido utilizada sola o en combinación para la estimulación del sistema inmunológico en diversas enfermedades como cáncer._x000D_ En proyectos anteriores hemos demostrado la utilidad del uso de altas concentraciones de interleucina-2 (IL-2) para inhibir la proliferación de células de cáncer cérvico uterino (CaCU), además hemos desarrollado un modelo de inducción de tumores humanos en ratones inmunodeprimidos y demostramos que la aplicación de altas concentraciones de IL-2 encapsulada en liposomas catiónicos reduce significativamente las masas tumorales generadas. Por otro lado, hemos evaluado la farmacocinética de la IL-2 así como la cuantificación de la proteína contenida en los liposomas. También evaluamos la reducción de los efectos tóxicos adversos causados por la citocina y propusimos un modelo en el que explicamos no solo la acción antineoplásica de la IL-2 sino la posible activación del sistema inmunológico con el uso de los liposomas como acarreadores de la citocina. Como resultado de nuestras investigaciones hemos publicado dos artículos internacionales y una patente de los liposomas como una composición de un producto antineoplásico e inmunorregulador y su uso para el tratamiento de cáncer cérvico uterino (MX/a/2008/008681)._x000D_ En el presente proyecto pretendemos dar un paso más, mediante la caracterización farmacéutica con fines de preformulación, para que en un futuro nuestros liposomas puedan ser usados como una alternativa terapéutica. Por lo anterior, caracterizaremos nuestros liposomas catiónicos como un sistema farmacéutico mediante estudios de viscosidad, microscopía y citometría de flujo. Posteriormente se determinara su estabilidad en diferentes condiciones de humedad, pH, iluminación y temperatura y una vez determinadas sus mejores condiciones de estabilidad realizar estudios de compatibilidad del sistema farmacéutico con diferentes posibles excipientes, con la finalidad de contribuir con una alternativa de calidad y farmacéuticamente aceptable que cumpla con las normas mexicanas vigentes en materia farmacéutica. Esperamos finalmente proponer una patente para una presentación farmacéuticamente aceptable de nuestro sistema._x000D_

El cáncer cérvico uterino (CaCu) es la principal causa de muerte por neoplasias malignas entre las mujeres mexicanas. Este tumor está asociado fuertemente a una etiología viral, por lo que se piensa que podría ser un buen candidato para el uso de inmunoterapia usando IL-2. _x000D_ Nuestro grupo de trabajo ha demostrado que líneas celulares de cáncer cérvico- uterino (CaCU), como CALO e INBL poseen las tres cadenas del receptor para IL-2 (RIL-2) y que existe una expresión diferencial de las tres subunidades del RIL-2 dependiendo del estadio del tumor. También se ha determinado que el RIL-2 expresado es funcional y que la respuesta que se obtiene después de la unión al receptor depende de la concentración de IL-2 usada, ya que a concentraciones menores de 50 UI/mL la IL-2 tiene un efecto proliferador, mientras que a concentraciones a partir de 50 UI/mL se observa un efecto inhibidor._x000D_ Por otro lado, también hemos contribuido a esclarecer las vías de señalización intracelular que llevan a la proliferación o inhibición de células de carcinoma de cérvix en respuesta a IL-2, comparándolas con las de linfocitos normales. Demostramos que el patrón de fosforilación de ambas líneas celulares es diferente entre ellas y los linfocitos normales, ambas expresan JAK1 y JAK3 estando permanentemente activa JAK3 pero no JAK1, también expresan una activación constitutiva de STAT1, STAT3 y STAT5 y la estimulación con 10 UI/mL de IL-2 induce su dimerización y 100UI/mL la disminuye. Estos resultados muestran de que manera altas concentraciones de IL-2 inhiben la proliferación de las células de CaCU a través de la desfosforilación de proteínas importantes en la regulación del ciclo celular._x000D_ Nuestra meta final es usar IL-2 como una alternativa terapéutica para las pacientes con CaCU, por lo que en un proyecto anterior (IN215300), se busco una estrategia para administrar una dosis alta de IL-2, demostrando que la administración de 100 UI/mL de IL-2 encapsulada en liposomas catiónicos puede reducir el tamaño promedio de los tumores de carcinoma de cérvix inducidos en ratones de la cepa CBA, disminuyendo el número y la intensidad de efectos adversos. Posteriormente en el proyecto IN216502, en colaboración con el Dr. Miguel Ibáñez y la Dra. Isabel Baeza del Laboratorio de Biomembranas de la Escuela Nacional de Ciencias Biológicas del IPN, se ha establecido que la interacción de diferentes tipos de liposomas con la IL-2 no afecta a la conformación de las partículas en forma de bicapas, se ha demostrado la presencia de la citocina no solo en la parte interna sino también en la parte exterior de las membranas de los liposomas, lo cual puede servir como un elemento direccionador para sus células blanco. Adicionalmente se ha caracterizado morfológicamente a estas partículas lo cual nos proporciona una herramienta muy valiosa para su identificación en las masas tumorales (o en su caso en las diferentes preformulaciones) lo que nos ha permitido mostrar su presencia en las células tumorales._x000D_ Posteriormente en el proyecto PAPIIT IN220108 evaluamos la farmacocinética de la IL-2 contenida en los liposomas acarreadores utilizados para la reducción de tumores inducidos en ratones, evaluamos el posible daño mediante la detección de proteínas indicadoras en los sueros de los animales , cuantificamos la cantidad de IL-2 acarreada y propusimos un modelo de la interacción de nuestros acarreadores, las células tumorales y las del sistema inmunológico y finalmente presentamos la patente de nuestros liposomas catiónicos caracterizados como una composición de un producto antineoplásico e inmunorregulador y su uso para el tratamiento de cáncer cérvico uterino (MX/a/2008/008681)._x000D_ Pensamos que después de más de 15 años de trabajo con el carcinoma de cérvix, se ha obtenido información relevante acerca de su biología y nos encontramos en un momento importante de la investigación ya que podemos aplicar los conocimientos generados por nuestro grupo de trabajo y el del Dr. Ibáñez para, con el apoyo del Dr. Soto y la Dra. Gil, proponer una forma farmacéuticamente aceptable y de calidad para nuestro sistema acarreador de IL-2 que pueda proporcionar en un futuro una alternativa terapéutica inmunológica capaz de inhibir el crecimiento tumoral y estimular la respuesta inmune del paciente oncológico reduciendo efectos secundarios tóxicos. Para lograr lo anterior, es importante caracterizar farmacéuticamente mediante pruebas de viscosidad, microscopía y citometría de flujo, a nuestros acarreadores para proceder a evaluar su estabilidad ante diferentes condiciones y finalmente de acuerdo a los resultados de estabilidad probar diferentes excipientes posibles para presentar la patente de una forma farmacéutica de calidad que cumpla con las normas oficiales mexicanas vigentes y que nos permita proponer su uso como una alternativa terapéutica. _x000D_ Finalmente, esperamos que los resultados de este proyecto nos puedan ayudar a continuar con nuestro objetivo de poder utilizar estas nanopartículas no solo como acarreadores de un fármaco o de citocinas, sino como portadoras de uno o varios antígenos expuestos que puedan ser reconocidos por sus células blanco y además contener otra citocina o fármaco, de tal forma que puedan utilizarse como partículas “puente” para reconocimiento intercelular._x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_