Cuando se presenta una agresión al cerebro se activan respuestas que inducen muerte celular, sin embargo también se activan mecanismos que parecen ser de protección y han dado lugar al concepto de neuroprotección. Posterior a un traumatismo craneoencefálico (TCE) se desencadenan mecanismos que traen como consecuencia liberación de neurotransmisores excitadores tales como glutamato, lo que provoca una entrada masiva de calcio en las neuronas, activación de proteasas, lipasas, sintasa de óxido nítrico, endonucleasas, activación de vías apoptóticas, producción de radicales libres y potencialmente necrosis y/o apoptosis; pero no todos los cambios son dañinos, se sabe que algunos tienen efectos protectores, por ejemplo la activación de los sistemas inhibitorios GABAérgicos y canabinérgicos puede contrarrestar el efecto exitotóxico desencadenado por el sistema glutamatérgico. Se ha observado que el daño varía dependiendo de la hora del día en que éste ocurre. En el laboratorio hemos visto una respuesta de autoprotección mayor durante las horas de oscuridad respecto a las horas de luz. Creemos que puede deberse, en parte, a una diferencia en la grado de activación de los sistemas inhibitorios en la que seguramente el ciclo sueño-vigilia juega un papel preponderante. Tenemos resultados que señalan una variación diurna en la expresión del receptor a canabinoides CB1 en diversas regiones en cerebro de rata, y en la literatura se ha documentado que la concentración de algunos endocanabinoides endógenos varía a lo largo del día. Así mismo hemos documentado que la privación de sueño incrementa la expresión del CB1. En este proyecto analizaremos el efecto de la modificación del ciclo sueño–vigilia sobre la recuperación frente a un TCE; la modificación en la expresión de los receptores a canabinoides CB1 y CB2, así como de las enzimas NAPE-PLD; FAAH y MGL, que participan en la síntesis y degradación, de la anandamida y del 2-AG, los dos más importantes endocanabinoides descritos en ratas sometidas a un TCE y a privación de sueño.

Los eventos traumáticos representan una de las principales causas de muerte, entender las respuestas, tanto las que inducen daño celular como aquellas de neuroprotección, que el organismo despliega frente a un evento traumático es de suma importancia. Nosotros hemos descrito que la recuperación frente a un traumatismo depende de la fase del ciclo luz-oscuridad en que éste ocurre, y creemos que es debido a que el balance entre las repuestas de daño y las de neuroprotección varían a lo largo de las 24 horas del día y dependen del ciclo sueño-vigilia, y que este efecto puede explicarse, al menos en parte, por la activación del sistema canabinérgico, por lo que estamos interesados en analizar las variaciones que presenta este sistema en ratas privadas de sueño posterior a un TCE. Esta información nos ayudara a entender porque un sujeto es más susceptible a una hora del día frente a un TCE y nos ayudará a planear mejores estrategias para la recuperación. Así mismo nos bridará información valiosa sobre la activación del sistema canabinérgico que ayudará a entender mejor su función. CONSIDERACIONES ÉTICAS Y/O CARTA DE CONSENTIMIENTO BAJO INFORMACIÓN En este proyecto se utilizarán los procedimientos reportados en la Norma Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999 para el uso de animales de experimentación. El proyecto se realizará en ratas machos adultos de la cepa Wistar, mantenidas en bioterios con condiciones de temperatura y humedad controladas y confortables, se les proporcionará agua y alimento ad limitum y se mantendrán en un ciclo de luz-oscuridad (12:12). Todos los procedimientos que causen dolor se realizarán bajo anestesia. Posterior a cualquier cirugía se les administra antibiótico por vía intraperitoneal. Se utilizará un modelo de TCE que permite tener un control fino sobre el tamaño y la profundidad de la lesión y que se circunscribe a un área cerebral reducida lo que evita un mayor daño al estado general de la rata. Este modelo permite utilizar pocos animales experimentales, ya que al producir una lesión reproducible reduce la dispersión de las variables medidas. Se utilizaran grupos de 5 ratas para los análisis planteados. Los mismos animales se utilizarán para los análisis de inmunohistoquímica, y para las tinciones de violeta de cresilo y de Hoechst. En otro grupo de animales se llevarán a cabo los análisis tipo Western blot, RT-PCR, y grado de edema. No se pueden llevar a cabo todos los análisis en los mismos animales ya que estos últimos requieren tejido sin perfundir. Sólo en caso que el análisis lo requiera se procederá a utilizar una muestra mayor y se informará á la comisión de ética.