El estrés provoca cambios fisiológicos y conductuales y es un importante disparador de desórdenes metabólicos (obesidad, anorexia), inmunes y psiquiátricos. En respuesta a cualquier tipo de estés se activa el eje hipotálamo-pituitaria-adrenal y aumenta el nivel de glucocorticoides circulante. Este eje, junto con el HP-tiroides son los principales reguladores del metabolismo y balance energético. El adecuado funcionamiento del organismo dependerá de su capacidad de restablecer la homeostasis. Este proyecto estudiará el efecto de los glucocorticoides y las hormonas tiroideas en la síntesis de TRH (neuropéptido hipotalámico responsable del funcionamiento del eje HPT). En particular, la interacción entre las señales hormonales y las neuronales que en un momento dado decodifica la neurona TRHérgica y provocan un incremento ó inhibición de la síntesis y liberación del péptido. El proyecto es continuación del IN-25507 gracias al cual se ha demostrado que los glucocorticoides interfieren con la señalización de las vías de traducción del AMPc en la transcripción del gen de TRH. Pretendemos ahora identificar los mecanismos involucrados. Los estudios se realizarán en células de cultivo primario hipotalámicas, incubadas con hormonas y neurotransmisores, en las que se determinarán los niveles de RNAm de pro-TRH así como la unión de factores transcripcionales a cromatina conteniendo el promotor del gen de proTRH (técnica de inmunoprecipitación de cromatina). Hemos identificado los elementos de respuesta a los que se unen los factores de transcripción regulados por AMPc (CREB) y los receptores a hormonas tiroideas (TR) y glucocorticoides (GR); estudiaremos la relevancia de cada sitio en líneas celulares cotransfectadas con plásmidos conteniendo al promotor de TRH unido a un gen reportero (luciferasa), ó el receptor de glucocorticoides o de hormonas tiroideas y el que transcribe para CREB. Se analizará la interacción entre los distintos factores y su repercusión en la tasa de síntesis. Las posibles interacciones proteína:proteína entre los factores activados serán evaluadas inmunocitoquímicamente. La dinámica de estas interacciones serán analizadas con el objetivo de definir el el nivel en el que eventos homeostáticos son alterados (i.e. duración o intensidad del estímulo).

Este proyecto es de investigación básica cuyos resultados podrán eventualmente incidir en la salud en el humano. La desregulación de los sistemas de retroalimentación que permiten la homeostasis, causada por el estrés, se reconoce ahora como la causa de muchas enfermedades metabólicas como la obesidad, anorexia, diabetes. _x000D_ Estudiaremos los mecanismos involucrados en la regulación de la biosíntesis de TRH, neuropéptido hipotalámico que controla el eje tiroideo, principal responsable del metabolismo y el equilibrio energético. En particular, el modo en que los glucocorticoides interfieren con la señalización neuronal que controla respuesta endócrina provocada por la demanda ambiental y metabólica. _x000D_