En recorridos realizados durante los meses de Enero a Febrero del 2009 se observaron daños severos de moteados cloróticos, anillos cloróticos irregulares, marchitez, reducción del crecimiento y muerte de plantas de diversos géneros de orquídeas silvestres y cultivadas, que se comercializan en mercados locales, centros comerciales, viveros e invernaderos de la Ciudad de México y Cuernavaca, Estado de Morelos. Análisis fitopatológicos del material vegetativo con los daños antes descritos, realizados en el laboratorio de Microbiologia de la UBIPRO-FES-IZTACALA, indicaron la presencia virus desconocidos como los agentes causales de los síntomas observados en plantas de orquídeas silvestres y cultivadas. En México se desconoce la identidad de los virus que afectan a las orquídeas, su distribución y el efecto real sobre la producción. _x000D_ _x000D_ Se realizaron pruebas de detección de proteína viral utilizando 12 antisueros comerciales distintos(Inmuno-strips y DAS-ELISA), confirmando la presencia de los virus Cymbidium Mosaic Virus (CymMV. Potexvirus) y Odontoglossum Ringspot Virus (ORSV. Tobamovirus)en muestras de 20 generos y especies de orquideas distintas. La mayor frecuencia de infección fue para el virus CymMV y la menor para infecciones del ORSV o en mezcla de ambos, señalando que al parecer la mayor cantidad de síntomas fueron causados por el CymMV. Se detectó material sin síntomas, daños moderados y severos con infecciones solo por CymMV. No se descartó la presencia de otros virus, que tendría que varificarse con pruebas adicionales, como transmisión mecanica a rango de hospedantes y observaciones al microscopio electrónico del tipo de partículas virales presentes en el material afectado._x000D_ _x000D_ Se confirmó la identidad del CymMV y ORSV por clonación y secuención de fragmentos de los genes de la proteína de la cápside (CP)de ambos virus y por comparación de las secuencias obtenidas con las disponibles en el GenBank (NCBI), con las que mostraron una homología del 90-100% para las secuencias comparadas de ambos virus._x000D_ _x000D_ Se ha determinado en algunas especies de orquideas, una alta tasa de infecciones conjuntas del CymMV y del ORSV, que no es raro en virus que infectan plantas. Se ha precisado que ORSV determina la movilidad celular, a corta y larga distancia del CyMoV en el hospedante, y al parecer favorece la replicación de este virus incrementando la concentración de particulas virales y la severidad de los síntomas observados. No se tiene certeza que ocurre con el ORSV en el hospedante, en cuanto concentración viral y capacidad infectiva. _x000D_ _x000D_ Sin embargo, no todas las especies de orquídeas muestran la misma susceptibilidad a la infección por uno u otro de los virus, además que no en todas las especies se observan coinfecciones de ambos virus, ni existe una relación directa de mayor severidad de daños en infecciones simples o en coinfección._x000D_ _x000D_ Este fenomemo de complementación entre CymMV y ORSV, de grupos taxonómicos distintos, resulta interesante, pero aún más resulta que la complementación, está condicionada por la combinación de solo variantes compatibles de ambos virus. Es posible que existan ciertos componentes celulares desconocidos que condicionan la virulencia y la expresión de síntomas, ya sea en las infecciones simples o en mezcla de ambos virus. Es posible que ese componente celular sea particular a cada especie del hospedante, considerando la variación de síntomas observados. _x000D_ _x000D_ Por todo lo anterior, se proponen dos hipotesis que pudieran explicar lo observado: Uno, existen variantes patogénicas del CymMV y ORSV solo compatibles para la coinfección de sus hospedantes; dos, los niveles de susceptibilidad-resistencia entre los géneros y especies de las orquideas que se cultivan en México (silvestres e introducidas)está determinado por algún componente celular desconocido, que además condiciona la expresión de virulencia del CymMV y ORSV en infecciones individuales o en mezcla._x000D_ _x000D_ Por tanto, los objetivos de la propuesta son: _x000D_ _x000D_ 1.- Caracterizar molecularmente variantes del CymMV y del ORSV compatibles para la co-infección de diversas especies y generos de orquideas que se cultivan en México, incluidas plantas silvestres. 2.- Identificar el factor molecular en CymMV o ORSV que permite la compatibilidad. 3.- Determinar la frecuencia de variantes compatibles en distintos géneros y especies de orquideas 4.- Determinar el componente celular que condiciona la expresión y variación de síntomas.

En recorridos de recolecta, realizados en 2009, en invernaderos, viveros y centros comerciales, se observó una gran diversidad de síntomas en plantas de diversas especies de orquideas. La incidencia de estos daños variaron de un 90 al 100% en algunas especies y en otras se observaron daños leves o ningúno._x000D_ Mediante ensayos serológicos de detección de proteína viral (Inmunotiras y ELISA), utilizando antisueros comerciales específicos para varios virus, se demostró que estos daños eran causados principalmente por dos virus, uno que se identificó como Cymbidium mosaic virus (CymMV. Potexvirus) y el otro como Odontoglossum Ringspot Virus (ORSV. Tobamovirus), ambos no descritos previamente en México. Se detectaron infecciones individuales o en mezcla con ambos virus, sin embargo pero la mayoría de las plantas estuvieron infectadas con CymMV, aún las asintomáticas. _x000D_ Se confirmó la identidad de ambos virus por secuenciacíon parcial de los genes de la proteína de la cápside (CP), obtenidas a partir de los productos de rt-PCR clonados y su comparación con la base de datos del Genbank (NCBI)._x000D_ _x000D_ Los resultados de la detección por serología (ELISA) y los obtenidos por la secuenciación, comparando con los daños observados en las plantas de las diferentes especies de orquideas recolectadas, indicaron cierta expresión diferencial por especie de orquidea, que no se pudo explicar con los datos recabados, pero que pudieran indicar la presencia de variantes del virus con diferentes niveles de patogénicidad o diferentes niveles de susceptibilidad-resistencia por especie de orquidea._x000D_ _x000D_ El CymMV se transmite mecánicamente durante el manejo entre plantas enfermas a sanas, probablemente se transmite por injerto y por el polen durante los ensayos de hibridación entre especies. No se conocen insectos vectores y los síntomas están relacionados con temperaturas relativamente cálidas. _x000D_ _x000D_ Los productores de orquideas propagan su propio material o lo adquieren de productores vecinos o en introducciones ilegales del extranjero, por lo que ignoran que están propagando este virus y otros virus a nuevas regiones, y no tienen métodos de diagnóstico que les garanticen que el material que adquieren o venden esta libre de virus. Esto ha tenido fuertes restricciones a la comercialización de las orquideas nacionales en el extranjero y a la importación de nuevos materiales, a la que se le han puesto fuertes restricciones por parte de la Dirección General de Sanidad Vegetal, que ha impuesto normatididades limitantes en el manejo de este grupo de plantas, todas impuestas por la sospecha de la presencia de virus, principalmente del CymMV y del ORSV. _x000D_ _x000D_ En México se desconoce la identidad de otros virus que infectan a las orquideas en general y en particular se desconoce la distribución del CymMV, su variación polimórfica o de virulencia (variantes patogénicas)y la posible tolerancia o resistencia al CymMV de las diferentes especies de orquideas que se cultivan en México._x000D_ _x000D_ Por tanto las contribuciones que se derivarían de la presente propuesta serían: _x000D_ 1.- Contar con un inventario de los virus que afectan a las orquideas que se cultivan o comercializan en México, lo que podría fundamentar la normatividad respecto a la comercialización de orquideas en nuestro país._x000D_ 2.- Establecer la distribución del CymMV y sus variantes, así como precisar su importancia en la producción y rendimiento de las orquideas en México._x000D_ 3.- Determinar la presencia de generos y especies con resistencia al CymMV._x000D_ 4.- Desarrollar métodos de detección y diagnóstico de este virus, que permitan certificar material libre de virus, con fines de propagación o incluso de conservación y de normatidad en materia de sanidad vegetal.