Por su amplia distribución y su alta virulencia, Haemonchus contortus es considerado el nematodo más importante de los ovinos. Una de las estrategias propuestas para su control es el desarrollo de inmunógenos. Por lo anterior, es importante entender qué mecanismos inmunológicos se relacionan a la resistencia o a la protección en esta infección._x000D_ Nuestro grupo demostró que los corderos de una raza de baja susceptibilidad (Blackbelly) presentan mayor cantidad de anticuerpos específicos así como eosinófilos sanguíneos y abomasales que los corderos de una raza de alta susceptibilidad (Columbia) tras la infección experimental con H. contortus. Además, encontramos diferencias en las subpoblaciones de linfocitos abomasales entre estas dos razas. Sin embargo, no hemos determinado si las células están activadas y qué tipo de interleucinas se están produciendo. _x000D_ En otro trabajo previo, realizado por nuestro grupo, desarrollamos un modelo de protección inducida contra la hemoncosis experimental en corderos de una raza susceptible, basado en la administración de un extracto del metacestodo de Taenia hydatigena. No se determinó qué tipo de respuesta fue la que protegió a los corderos ni qué poblaciones de linfocitos eran las dominantes o qué tipo de citocinas están produciendo, por lo que, estudiar los perfiles de las citocinas producidas, puede ayudar a entender las diferencias de susceptibilidad a la haemoncosis._x000D_ Por lo anterior el objetivo de este proyecto es comparar y cuantificar los perfiles de citocinas producidas por los linfocitos abomasales de corderos Columbia con y sin protección inmunológica inducida contra H. contortus. Además, se asociarán dichos perfiles con cantidad de eosinófilos y anticuerpos._x000D_ Se utilizarán 50 corderos Columbia que serán divididos en 4 grupos. Los corderos del grupo 1 (n=15) serán inoculados con L3 de H. contortus, los del grupo 2 (n=15) recibirán un extracto de metacestodo de T. hydatigena (ExmTh) y posteriormente serán inoculados con L3 de H. contortus, los del grupo 3 (n=15) solo recibirán ExmTh y los del grupo 4 (n=5) solo recibirán el vehículo del extracto._x000D_ Cinco corderos de los grupos 1, 2 y 3 serán sacrificados a las semanas 1, 4 y 7 p.i., los corderos del grupo 4 se sacrificarán la semana 0 del experimento. Se colectará linfonodo abomasal así como tejido de las regiones fúndica y pilórica abomasal. En estos tejidos se contarán el número de eosinófilos y mastocitos tisulares, además, por RT-PCR en tiempo real se medirá la cantidad de RNAm codificador de citocinas presente en extractos linfocitarios de pared y linfonodo abomasal. Se purificarán linfocitos abomasales y se estimularán con antígenos de H. contortus, se medirán las citocinas producidas y por RT-PCR en tiempo real se medirá la cantidad de RNAm codificador de las mismas. Se tomarán muestras de bilis para medir los títulos de anticuerpos. También se contarán y medirán las fases adultas presentes en el abomaso. Semanalmente se medirán diversos parámetros parasitológicos y hematológicos, así como los títulos de anticuerpos séricos por ELISA y el peso corporal._x000D_ Con los datos de este proyecto se propondrá un modelo de respuesta inmune a nivel celular y molecular que explique de manera integrada la protección y la resistencia a la hemoncosis. Determinar qué tipo de respuesta inmune y cuáles son las citocinas más importantes en la protección, nos servirá para proponer posibles tipos de moduladores de la respuesta inmune que se agreguen junto con antígenos de H. contortus en futuros protocolos de inmunización._x000D_

El presente proyecto forma parte de una línea de investigación que hemos desarrollado durante varios años en el laboratorio 1 del la Unidad de Investigación Multidisciplinaria de la FES-Cuautitlán. En una primera etapa de esta línea de investigación, comparamos la suceptibilidad/resistencia de diferentes genotipos ovinos a la hemoncosis y los asociamos a factores productivos y a algunos parámetros inmunológicos, entre ellos, a un aumento de eosinófilos abomasales y sanguíneos (Muñoz-Guzmán y col., 2006; Alba-Hurtado y col., 2010). En una segunda etapa inducimos protección a la hemoncosis por la aplicación de un extracto del metacestodo de Taenia hydatigena y asociamos esta protección con un aumento de eosinófilos y linfocitos CD4+ en pared abomasal (Cuenca-Verde y col., 2011). En una tercera etapa, demostramos que la respuesta inmune que se monta contra la hemoncosis en el abomaso varía en las regiones abomasales, de tal manera que en un mismo cordero la respuesta de la región fúndica del abomaso no es igual que la respuesta en la región pilórica (Muñoz-Guzmán y col., 2012). _x000D_ En el presente proyecto se determinarán y cuantificarán los perfiles de citocinas producidas por los linfocitos abomasales de corderos Columbia con y sin protección inmunológica inducida. Con los datos que se obtendrán en este proyecto se propondrá un modelo de respuesta inmune a nivel celular y molecular que explique de manera integrada la protección y la resistencia a la hemoncosis. _x000D_ Determinar qué tipo de respuesta inmune y cuáles son las citocinas más importantes en la protección, nos servirá para proponer posibles tipos de moduladores de la respuesta inmune que se agreguen junto con antígenos de H. contortus en futuros protocolos de inmunización. _x000D_