En proyectos anteriores hemos demostrado la utilidad del uso de altas concentraciones de interleucina-2 (IL-2) para inhibir la proliferación de células de cáncer cérvico uterino (CaCU), además hemos desarrollado un modelo de inducción de tumores humanos en ratones inmunodeprimidos y demostramos que la aplicación de altas concentraciones de IL-2 encapsulada en liposomas catiónicos reduce significativamente las masas tumorales generadas. Por otro lado, hemos evaluado la farmacocinética de la IL-2, así como la cuantificación de la proteína contenida en los liposomas. También evaluamos la reducción de los efectos tóxicos adversos causados por la citocina y propusimos un modelo en el que explicamos no solo la acción antineoplásica de la IL-2 sino la posible activación del sistema inmunológico con el uso de los liposomas como acarreadores de la citocina. Como resultado de nuestras investigaciones hemos solicitado una patente, misma que ha sido publicada en las bases de datos nacionales e internacionales, se ha pasado el examen de forma y actualmente esta en examen de fondo dicha patente protege en favor la UNAM y de los investigadores a los liposomas como una composición de un producto antineoplásico e inmunorregulador y su uso para el tratamiento de cáncer cérvico uterino (MX/a/2008/008681), así como tres artículos internacionales. En el proyecto que concluiremos este año caracterizamos a los liposomas como un sistema farmacéutico y presentaremos un par de artículos, así como una patente para una forma farmacéutica aceptable que cumpla con las normas mexicanas vigentes._x000D_ Los resultados obtenidos en el proyecto PAPIIT IN228111 vigente, indican que aunque el sistema nanoacarreador supera la estabilidad de la IL-2, sería necesario comercializarlo como medicamento biológico en refrigeración. Por lo anterior, en el presente proyecto pretendemos optimizar la composición farmacéutica utilizando diferentes formas de preservación a largo plazo aprobadas por las normas nacionales e internacionales con la finalidad de contribuir con una alternativa de calidad y farmacéuticamente aceptable. Finalmente esperamos proponer una patente para el uso de esta nueva composición farmacéutica de nuestro sistema._x000D_

El cáncer cérvico uterino (CaCu) es la principal causa de muerte por neoplasias malignas entre las mujeres mexicanas. Este tumor está asociado fuertemente a una etiología viral, por lo que se piensa que podría ser un buen candidato para el uso de inmunoterapia usando IL-2. Nuestro grupo de trabajo ha demostrado que líneas celulares de cáncer cérvico- uterino (CaCU), como CALO e INBL poseen las tres cadenas del receptor para IL-2 (RIL-2) y que existe una expresión diferencial de las tres subunidades del RIL-2 dependiendo del estadio del tumor. También determinamos que el RIL-2 expresado es funcional y que la respuesta que se obtiene después de la unión al receptor depende de la concentración de IL-2 usada ya que a concentraciones menores de 50 UI/ml la IL-2 tiene un efecto proliferador, mientras que a concentraciones a partir de 50 UI/ml se observa un efecto inhibidor._x000D_ Por otro lado, también hemos contribuido a esclarecer las vías de señalización intracelular que llevan a la proliferación o inhibición de células de carcinoma de cérvix en respuesta a IL-2, comparándolas con las de linfocitos normales. Demostramos que el patrón de fosforilación de ambas líneas celulares es diferente entre ellas y los linfocitos normales, ambas expresan JAK1 y JAK3 estando permanentemente activa JAK3 pero no JAK1, también expresan una activación constitutiva de STAT1, STAT3 y STAT5 y la estimulación con 10 UI/ml de IL-2 induce su dimerización y 100UI/ml la disminuye. Estos resultados muestran de que manera altas concentraciones de IL-2 inhiben la proliferación de las células de CaCU a través de la desfosforilación de proteínas importantes en la regulación del ciclo celular._x000D_ Nuestra meta final es usar IL-2 como una alternativa terapéutica para las pacientes con CaCU, por lo que en un proyecto anterior (IN215300), buscamos una estrategia para administrar una dosis alta de IL-2. Demostramos que la administración de 100 UI/ml de IL-2 encapsulada en liposomas catiónicos puede reducir el tamaño promedio de los tumores de carcinoma de cérvix inducidos en ratones de la cepa CBA, disminuyendo el número y la intensidad de efectos adversos. Posteriormente en el proyecto IN216502, establecimos que la interacción de diferentes tipos de liposomas con la IL-2 no afecta a la conformación de las partículas en forma de bicapas, hemos demostrado la presencia de la citocina no solo en la parte interna sino también en la parte exterior de las membranas de los liposomas, lo cual puede servir como un elemento direccionador para sus células blanco. Adicionalmente hemos caracterizado morfológicamente a estas partículas lo cual nos proporciona una herramienta muy valiosa para su identificación en las masas tumorales (o en su caso en las diferentes preformulaciones) lo que nos ha permitido mostrar su presencia en las células tumorales._x000D_ Posteriormente en el proyecto PAPIIT IN220108 evaluamos la farmacocinética de la IL-2 contenida en los liposomas acarreadores utilizados para la reducción de tumores inducidos en ratones, evaluamos el posible daño mediante la detección de proteínas indicadoras en los sueros de los animales, cuantificamos la cantidad de IL-2 acarreada y propusimos un modelo de la interacción de nuestros acarreadores, las células tumorales y las del sistema inmunológico y presentamos la patente de nuestros liposomas catiónicos caracterizados como una composición de un producto antineoplásico e inmunorregulador y su uso para el tratamiento de cáncer cérvico uterino (MX/a/2008/008681). Actualmente la patente ya ha sido publicada, con lo cual los derechos morales y patrimoniales de la UNAM y de los investigadores están protegidos y se encuentra en examen de fondo. Además en el proyecto vigente PAPIIT IN 228111 hemos caracterizado farmacéuticamente los liposomas como sistema acarreador y a partir de sus propiedades fisicoquímicas hemos fabricado y evaluado la estabilidad de la formulación en su sistema contenedor/cierre, por lo que entregaremos como producto final una nueva patente y un artículo internacional, así como tres tesis de Licenciatura, entre otros productos._x000D_ Pensamos que después de más de 18 años de trabajo con el carcinoma de cérvix, hemos obtenido información relevante acerca de su biología y nos encontramos en un momento importante de la investigación ya que podemos aplicar los conocimientos generados por nuestro grupo de trabajo y con el apoyo del Dr. Soto y la Dra. Gil, proponer no solo una forma farmacéuticamente aceptable y de calidad para nuestro sistema acarreador de IL-2, sino también que sea estable por un período mayor a un año, que pueda proporcionar en un futuro una alternativa terapéutica inmunológica capaz de inhibir el crecimiento tumoral y estimular la respuesta inmune del paciente oncológico reduciendo efectos secundarios tóxicos. Para lograr lo anterior, es importante optimizar la composición farmacéutica con la finalidad de que la IL-2 mantenga su actividad biológica por un período mayor a un año, mediante el uso de agentes protectores, así como probar su estabilidad de acuerdo a los parámetros requeridos por la Norma Oficial Mexicana para la estabilidad de medicamentos (NOM 073, 2005) para presentar una patente más de una forma farmacéutica de calidad que cumpla con las normas oficiales mexicanas vigentes y que nos permita proponer su uso como una alternativa terapéutica. _x000D_ Es importante mencionar que los resultados de este proyecto nos ayudaran a abrir el camino en el uso de estas nanopartículas no solo como acarreadores de un fármaco o de citocinas, sino como portadoras de uno o varios antígenos expuestos que puedan ser reconocidos por sus células blanco y además contener otra citocina o fármaco, de tal forma que puedan utilizarse como partículas “puente” para reconocimiento intercelular._x000D_ Por último, otra contribución importante de este proyecto es la integración de alumnos de los últimos semestres de la Carrera Química Farmacéutica Biológica que a la vez que utilizan espacios y desarrollos similares a los que encontrarán en su campo laboral, mejoran su formación y colaboran de forma importante en proyectos de investigación._x000D_