La infección ocasionada por el virus dengue (DENV) afecta a un tercio de la población mundial que habita en regiones tropicales y subtropicales (OMS). Anualmente se infectan entre 50 y 100 millones de personas a nivel mundial y aproximadamente 500,000 desarrollan las formas graves como son la Fiebre hemorrágica por dengue (DHF) y el Síndrome de choque por dengue (SCHD). El DENV es transmitido al humano mediante la picadura de la hembra hematófaga de mosquitos del género Aedes como A aegypti, A. alpbopictus (Halstead, S. 2007; OMS 2008). Actualmente no existe una vacuna efectiva y segura contra el dengue, no hay un tratamiento específico (antiviral) y no se cuenta con un modelo animal para el estudio de la patogenia. El cuadro clínico de la Fiebre por dengue (DF) ó Dengue clásico, se caracteriza por la presencia de fiebre elevada, dolor de cabeza, dolor retro-orbital, nauseas, vómito, altralgias, mialgia y leucopenia (Rothman, A. 2004), este síndrome es autolimitante en un 90-95% de los casos. Sin embargo, un 5-10% de los pacientes presentan las formas severas(DHF/SCHD). La alteración fisiológica más importante durante DHF/SCHD es el incremento en la permeabilidad vascular (por vasculopatía) con fuga de plasma al espacio intersticial y presencia de choque hipovolémico. Asimismo, pueden presentarse alteraciones hemostáticas importantes (CID y Hemorragia)que se atribuyen principalmente a una coagulopatía por consumo que culmina en sangrado, ya que cuando se consumen los factores de la coagulación se presenta la hemorragia (Tero, D. et al., 2009). Existen dos hipótesis que intentan explicar los casos desafortunados de la enfermedad. Una es la variación antigénica que presentan los aislados virales mientras circulan en la naturaleza (entre el mosquito y el humano)generando cepas más agresivas y la segunda se refiere a la facilitación de la infección viral mediada por anticuerpos heterotípicos no neutralizantes (ó facilitadores)generados en el curso de una infección secundaria(Halstead, S & O'rourke, E. 1997; Kurane, I. 2007). Sin embargo, ninguna de estas hipótesis explican las alteraciones de la coagulación (CID/ hemorragia) presente en las formas severas del dengue. Los mecanismos patogénicos de la coagulopatía-vasculopatía en el dengue hemorrágico aún no están totalmente elucidados. Durante el daño tisular los procesos de coagulación-inflamación forman parte escencial de la respuesta de defensa de los organismos. Sin embargo, la sobre-estimulación de estos mecanismos durante el proceso infeccioso forma parte de la enfermedad. _x000D_ En nuestro grupo, recientemente reportamos que (Huerta-Zepeda, A. et al., 2008)durante la infección de células del endotelio vascular humano (HUVEC) con DENV, se favorece la expresión de receptores de membrana que inician los procesos de coagulación-inflamación como son el Factor Tisular ó TF y los receptores activados por proteasas (PARs) como PAR-1 (que señalizan la producción de citocinas pro-inflamatorias). El Factor Tisular es el receptor fisiológico del (inicio de la coagulación) factor VII activado (FVIIa) y su zimógeno FVII loa cuales participan en la activación secuencial de la cascada de coagulación que culmina con la generación de trombina, enzima que activa (por hidrólisis)a los receptores activados por proteasas ó PARs los cuales señalizan tanto moleculas pro-inflamatorias , como pro-adherentes(Huerta-Zepeda, A. et.,al 2008). El TF es una glicoproteína transmembranal que se expresa de modo constitutivo en algunos tipos célulares fuera de la vasculatura como en los monocitos. También existe una forma soluble de TF (en micropartículas o MPs) provenientes de celulas monocíticas, presente en el torrente circulatorio que puede llegar a ser procoagulante ya que participa en la generación de trombos en donde existe daño al endotelio vascular (Chu, A. 2005; Wolberg, A. & Roubey, R. 2004; Mackman, N. 2004). El incremento de TF se ha asociado con diferentes condiciones trombóticas y estados hipercoagulables como la Coagulación intravascular diseminada ó CID. Una de las manifestaciones más importantes del DHF/SCHD es la coagulopatía, ya sea Coagulación Intravascular Diseminada y/o hemorragia (Srichaikul, T. & Nimmannitya, S. 2000; Srichaikul, T. et al., 1977). La CID es un complicación que también se ha descrito durante la infección por virus hemorrágicos como el Ébola (Geisbert, T. et al., 2003). El papel del TF en la CID durante la infección por Ébola es dual (como lo observamos durante la infección por DENV). Por un lado, como nucleador de coagulación (generando proteasas que activan receptores de inflmación como PARs) y por otro lado, como iniciador del proceso inflamatorio. La intervención terapéutica exitosa bloqueando TF en primates infectados con el virus Ebola, ha proporcionado evidencia clara de que la vía de la coagulación-inflamación por TF es un componente importante en la patogenia de fiebres hemorrágicas (Ruf. W. 2004). La sobre-expresión de TF puede llevar a CID y/o trombosis relacionada con falla multi-orgánica (Geisbert, T. et al., 2003)ya que el Factor Tisular puede ser liberado en micropartículas (del Conde, I. et al., 2005). En un estudio realizado en monos Rhesus, se demostró que durante la infección con el virus Ébola Zaire, se presenta tanto una sobreexpresión de TF en monocitos, como la liberación de micropartículas de membrana que expresan TF (TF soluble) que podría explicar la CID característica de esta infección (Geisbert, T. et al., 2003)._x000D_ Las micropartículas (MPs) TF positivas son fragmentos de membrana derivados de células activadas. Los monocitos no estimulados expresan niveles bajos de TF. Las MPs se forman por rearreglos estructurales del citoesqueleto y se liberan de las membranas celulares después de la activación celular y varían en su tamaño. En circulación, las MPs facilitan interacciones célula-célula e inducen señalización celular; pueden participar en inflamación, trombosis, angiogénesis y disfunción vascular. Las MPs se unen a plaquetas activadas durante la formación de trombos. _x000D_ En el presente proyecto, proponemos que en el daño al endotelio vascular(vasculopatía) observado durante DHF/SCHD pueda generarse por un incremento de MPs de origen monocítico (celula diana) que expresan TF (como sucede en Ebola Zaire) durante la infección por el virus dengue. Con base en lo anterior, nos propusimos llevar a cabo el estudio (en un modelo in vitro) de la posible participación MPs de origen monocitario (TF positivas) sobre el endotelio vascular, durante la infección con el virus dengue. _x000D_

La incidencia del Dengue se ha incrementado dramaticamente a nivel mundial. Aproximadamente el 40% de la población mundial vive en areas de riesgo para el Dengue. En México, durante la última década se han incrementado las formas severas de la enfermedad como La Fiebre Hemorrágica por Dengue y El Sindrome de Choque por Dengue(Secretaria de Salud). Actualmente no existe una vacuna segura ni efectiva contra este padecimiento. No existe un tratamineto específico (antiviral) ni se cuenta con un modelo animal para el estudio de la patogenia. Asi mismo, hasta la fecha no existen indicadores de riesgo de las formas severas de la enfermedad. Además de que las hipótesis propuestas en la actualidad,(facilitación de la infección mediada por anticuerpos heterotípicos no neutralizantes y Variación antigénica de los aislados virales) no explican la presencia de Coagulación intravascular diseminada que se observa en las formas graves. En el presente proyecto, nos proponemos llevar a cabo por un lado, el estudio de los posibles mecanismos involucrados tanto en la vaculopatía-coagulopatía durante la infección por virus dengue. Asimismo, podremos contribuir con la búsqueda de posibles indicadores de riesgo de las formas severas de la enfermedad (marcadores de daño tisular). Por otro lado, contribuiremos con la formación de recursos humanos especializados. La difusión de nuestros resultados en diferentes foros y La publicación de los mismos en una revista científica indizada de circulación internacional.