H. influenzae (Hi) no tipificable (NT) es una de las causas más importantes de infecciones del tracto respiratorio en adultos causando morbilidad crónica (exacerbaciones) y mortalidad temprana a nivel mundial y en México. En nuestro país ocasionalmente se aísla también H. influenzae b (Hib) de pacientes mayores con padecimientos no invasivos como neumonía y enfermedad pulmonar obstructiva cróanica EPOC. Antecedentes establecen que la carga para los sectores de salud por estas enfermedades es del doble o del triple que durante la década anterior. _x000D_ La presencia de Biofilms (biopelículas) generados por este microorganismo juega un papel muy importante en la patogénesis de la enfermedad mediando resistencia a las defensas del huésped y a la penetración y difusión de antimicrobianos. No existe en México información sobre la caracterización fenotípica de producción de biofilms por H. influenzae. _x000D_ Objetivo: En este estudio nuestro interés no es solo investigar la habilidad de cepas de H. influenzae aisladas de casos de EPOC para formar biofilms sino también la relación potencial entre el fenotipo categorizado de formación de biofilms y los atributos de ausencia o presencia cápsula b._x000D_ _x000D_ Se incluirán X cepas de H. influenzae (X de Hi NT y X de Hib) aisladas de pacientes con EPOC participantes en un estudio prospectivo 2008- 2011, ( en colaboración con el INER,SS., y el CMO IMSS.,) con identidad de Hi confirmada por PCR empleando secuencias SR 16 s, PME 6. El atributo de ausencia de cápsula se determinará mediante la búsqueda de secuencias Bex A y tipoespecíficas (a,b,c,d,e,f). Las evidencias de formación de biofilms se obtendrán mediante el método de cristal violeta empleando placas de ensayo de microtitulación de poliestireno (FBP). Se incluirán cepas de referencia NT Hi 2019 como formadoras de biofilm y la mutante NT Hi 2019 sia B- (que han sido donadas para este proyecto por Dr. E. Swords de North Carolina University) y Hi b ATCC 49766 entre otras ._x000D_ Para propósitos comparativos se clasificarán las capacidades de producción de biofilms de las cepas en cuatro categorías (categorizando), no formadoras de biofilm , poco productoras de biofilm, moderadamente y muy productoras, a partir de ODt+3DE=VC1._x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ _x000D_ Tomando en cuenta que la EPOC en México es una enfermedad de impacto social-económico considerable, es un asunto que merece atención. El gasto por parte de DGAPA-PAPIIT en este tema no evaluado, será una inversión que permitirá reducir el “burden” actual tan alto para el SS., así como inequidades y rezagos a nivel social. _x000D_ _x000D_ Si consideramos que la caracterización de la formación de biofilms de las poblaciones patógenas Hi NT causantes de EPOC en México es nula, aunado al hecho de que antecedentes indican que Hi b se relaciona con procesos por EPOC en adultos mayores, queda abierta la necesidad de la evaluación de datos al respecto. Conforme la distribución y el papel del biofilm en estas infecciones se defina en México, la caracterización de los mismos será una herramienta útil para la mejor comprensión de la patogénesis de la enfermedad, de la eficiencia de antimicrobianos y de la respuesta inmune hacia H. influenzae no tipificable y b. _x000D_

En congruencia con lo objetivos que se plantean aquí, mediante este estudio se persigue contribuir en las áreas de la Salud Pública y de la Epidemiología Molecular tanto a nivel nacional como internacional generando datos inexistentes sobre a) la habilidad de cepas de H. influenzae aisladas de casos de EPOC en México para formar biofilms y b) la distribución de las diferentes categorías del fenotipo de formación de biofilm c) y la distribución de biofilms según los atributos de ausencia de cápsula o presencia de cápsula b. _x000D_ _x000D_ Los datos cuantitativos que de aquí emerjan permitirán elucidar la relación entre el atributo formación de biofilm y respuestas negativas a los antibióticos y a la respuesta inmune natural de los pacientes con EPOC. Estos datos facilitarán esclarecer parcialmente el rol etiopatógénico del biofilm en esta entidad clínica en México._x000D_ _x000D_ Impactos: _x000D_ _x000D_ El proyecto es actual, relevante y pertinente ya que en nuestro país aún no se ha iniciado como materia, ningún tipo de estudio al respecto. _x000D_ Impacto tecnológico _x000D_ _x000D_ El empleo de esta metodología debe mirarse en términos de innovación tecnológica en dos sentidos._x000D_ _x000D_ 1) Por primera ocasión se aplicará en México la metodología de PCR para confirmar la identidad de H. influenzae en términos de cápsula. Esto es de interés particular, considerando que en nuestro país se aísla también H. influenzae b (Hib) de pacientes mayores con padecimientos crónicos como EPOC. En un trabajo previo nosotros demostramos las discrepancias de resultados entre la serología (ofrece errores) y PCR para tipificación de Hi._x000D_ 2) Es innovador en sentido de que el Sector Salud, no cuenta aún con algún programa de estudios relacionados con formación de biofilms. _x000D_ _x000D_ Impacto social- económico _x000D_ Los aspectos económico y social son dos rubros estrechamente asociados por lo que describo en un solo espacio._x000D_ Recientemente se ha destacado el vínculo entre medidas preventivas de salud y desarrollo social-económico de un país ya que el gasto en este tema es una inversión que permite reducir inequidades y rezagos. Actualmente varios millones de familias Mexicanas al año, se enfrentan a gastos imposibles de salud, lo que les obliga a decidir entre empobrecerse o no atender a esas necesidades. Con este trabajo intentamos apoyar al Sector Salud, para una mayor eficiencia en el uso de recursos, condiciones de operación y /ó proponer ideas que mejoren los programas de la clínica de EPOC, esperando que este esfuerzo se traduzca en un beneficio más general en favor de las familias con mayores rezagos._x000D_ _x000D_ Esclarecer parcialmente la etiopatogenia del biofilm en esta entidad clínica en México, podría influir en la disminución de costos de tratamientos, en la disminución de costos de horas de cama/mes/paciente en hospitales, de pruebas diagnósticas, de costos psicológico-sociales asociados al sufrimiento y al dolor etc., que suelen ocasionar otros problemas prioritarios que impactan negativamente social y económicamente. _x000D_ _x000D_ Considerando lo anterior como correcto, los responsables de emitir decisiones políticas en salud necesitan argumentos resultantes de evaluaciones como estas, que les convenzan de tratar esto como un asunto que merece atención. _x000D_ _x000D_ En adición, los resultados del proyecto son una mínima contribución pero podrán mitigar al menos parcialmente, el impacto de la terrible de la crisis socio-encónomica actual del país. _x000D_ _x000D_ Notas: _x000D_ -Actualmente nos encontramos en actual colaboración (agradecemos las transferencias tecnológicas que hemos recibido de su parte ) con investigadores del CDC. del NIH, y de la Universidad de Carolina del Norte en los EUA. La importancia del trabajo es sustantiva también dadas las posibilidades para transferir (a solicitud expresa por parte del INER) esta metodología a otros investigadores en otras instituciones con quien ya iniciamos esta transferencia._x000D_ -Con este proyecto la UNAM PAPIIT-DGAPA a través de la Fac. de Medicina, contribuye en apoyo al programa de capacitación para alumnos de licenciatura de de la Universidad Autómona de Veracruz. Se ha incorporado al proyecto para realizar tesis, un alumno de la misma. El, podrá realizar investigaciones semejantes ampliando el acervo del conocimiento en el área._x000D_ -Esperamos que este avance tenga también un impacto a nivel terapéutico en la práctica médica futura. Los resultados serán difundidos a través de publicaciones en revistas de circulación internacional como de boletines informativos de la Secretaría de Salud. _x000D_