La enzima prefenato deshidrogenasa se encuentra, de manera natural, formando una proteína bifuncional con la enzima corismato mutasa. Hemos encontrado que cuando la prefenato deshidrogenasa se fusiona en su amino terminal a una proteína marginalmente estable tiende a formar cuerpos de inclusión en el citoplasma de la bacteria. Este hecho limita la participación de la prefenato deshidrogenasa en la producción de tirosina, impidiendose el crecimiento de bacterias que carecen de la capacidad de sintetizar este aminoácido. En el presente proyecto pretendemos demostrar que la tendencia a agregarse de la prefenato deshidrogenasa puede ser una herramienta útil en el estudio de la relación estructura-función de proteínas: 1. puede utilizarse para mejorar la estabilidad de proteínas. 2. puede ayudar a identificar variantes estables de bancos de proteínas no naturales, como las producidas al mezclar azarosamente modulos estructurales o mezclas de elementos de estructura secundaria. 3. puede ayudar a identificar la ruta mas favorable de plegamiento de aquellas parejas de proteínas que contienen un alto grado de homología en secuencia de aminoácidos y que presentan diferente estructura tridimensional. Finalmente, los resultados obtenidos se contrastarán con estrategias de promoción de estabilidad aparentemente utilizada por proteínas reporteras como la CAT.

El presente proyecto pretende contribuir principalmente en el desarrollo de esquemas de selección para mejorar la termoestabilidad de proteínas. El proyecto puede ser importante para la identificación de polipéptidos estables obtenidos a partir de esquemas de combinación de modulos estructurales ó combinación de elementos de estructura secundaria. Creemos que esta estrategia permitirá identificar las rutas de plegamiento más favorables de proteínas con alta identidad de secuencia pero diferente estructura tridimensional. Finalmente, los resultados del presente proyecto pueden compararse con los obtenidos usando esquemas de estabilización alternativos como los observados en nuestro laboratorio con fusiones a la proteína cloranfénico acetíl transferasa (CAT).