Todos los días nos enfrentamos al riesgo que representa la exposición a contaminantes ambientales, por lo que, identificar los efectos de dicha exposición es uno de los principales objetivos de la investigación biomédica. Determinar si los compuestos existentes, o nuevos que se generan día a día, pueden causar daño a la secuencia de ADN es de los primeros pasos en la prevención y riesgo a la exposición ambiental._x000D_ El Citocromo P4501A1 (CYP1A1), es una isoenzima involucrada en el metabolismo de compuestos pro-mutagénicos, como los hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAH, por sus siglas en inglés), así como de aminas aromáticas policíclicas y algunos compuestos endógenos. La regulación de la expresión génica de CYP1A1 es llevada a cabo principalmente a través del receptor citosólico de hidrocarburos aromáticos policíclicos (AhR, por sus siglas en inglés) que participa en una cascada de señalización que culmina con la transcripción del gen. Sin embargo, poco se sabe de la regulación epigenética de este gen, el cual ha mostrado hipermetilación cáncer-específica conduciendo a la supresión de su expresión en experimentos in vitro que involucran cultivo de células cancerosas. In vivo, en individuos fumadores, se determinó que existe una correlación inversa entre el nivel de metilación de la región promotora del CYP1A1, su expresión y actividad pulmonar y el número de cigarros que consume al día los individuos. _x000D_ El presente estudio está encaminado al entendimiento del efecto que compuestos ambientales puedan tener sobre los mecanismos epigenéticos involucrados en la regulación de un gen tan importante como lo es el de CYP1A1._x000D_ Para responder a la pregunta planteada, se utilizarán modelos in silico e in vitro. In silico, evaluaremos la región regulatoria de CYP1A1 de rata, con la finalidad de definir las regiones de los elementos de respuesta (XRE) y de los sitios de unión a factores de transcripción susceptibles de metilación (sitios CpG), esto mediante el uso de diversos programas computacionales para predicción de lo mencionado. Con ello complementaremos el estudio in vitro y nos introduciremos al entendimiento de los posibles sucesos moleculares ante la exposición a los compuestos ambientales. _x000D_ In vitro, haremos uso de la línea celular C9 consistente en células hepáticas transformadas de rata. En ellas determinaremos el efecto dosis-respuesta de tres compuestos ambientales mediante la evaluación de la actividad de CYP1A1 en cultivo celular, en presencia y ausencia de un inhibidor de la metilación de ADN; cuantificaremos la presencia de metilasas importantes; determinaremos una dosis no letal de cada compuesto para el tratamiento crónico de las células; y finalmente, determinaremos el nivel de metilación de la región regulatoria de CYP1A1 ante el tratamiento con los compuestos ambientales. _x000D_

- Contribuir a la caracterización del perfil epigenético de contaminantes ambientales sobre enzimas involucradas en el metabolismo de xenobióticos._x000D_ _x000D_ - Formación de una estudiante de Doctorado (Programa de Maestría y Doctorado en Ciencias Bioquímicas) y una de Licenciatura (Fac. de Química)_x000D_ _x000D_ - Contribución al conocimiento de los mecanismos de la variabilidad individual como respuesta a la exposición a compuestos xenobióticos._x000D_ _x000D_ - Implementación de la técnica de determinación de actividad enzimática de CYP en cultivo celular._x000D_ _x000D_