Este proyecto de investigación es parte de un programa más amplio de estudio del carcinoma ductal de la mama en la mujer (CaDuMa), el que aspira a describir la diversidad de la relación inmunológica paciente/tumor entre distintos pacientes y en cada una de ellas a lo largo del curso de la enfermedad y su tratamiento. La hipótesis del programa es que la diversidad inmunológica entre pacientes es mayor que la comúnmente implicada para un tipo histológico específico y, asimismo, serán también diversas las presiones que cada paciente ejerce sobre el crecimiento y diferenciación de la población de células tumorales con el progreso del tiempo y la respuesta al tratamiento. Se espera que la información derivada del programa personalizado aporte conocimientos y tecnologías útiles en la prevención, diagnóstico y tratamiento del CaDuMa en México._x000D_ _x000D_ Para aspirar a lograr el objetivo general del programa es indispensable desarrollar señales inmunológicas conmensurables a la diversidad que pretenden describir, señales de alta resolución en cuanto a la identificación de antígenos, anticuerpos, citocinas, genes y células involucradas y en cuanto a su desempeño como inhibidoras o promotoras del crecimiento tumoral._x000D_ _x000D_ Este proyecto se enfoca al desarrollo de la identificación de los antígenos y anticuerpos séricos involucrados en el CaDuMa. A tal efecto se utilizará el Inmunoblot en dos dimensiones (2D-Inmunoblot), cuya sensibilidad, reproducibilidad y análisis computacional y estadístico hemos desarrollado recientemente para el estudio de mezclas complejas de antígenos de cisticercos de Taenia crassiceps y de la diversidad individual en la percepción inmunológica del parásito por parte de los ratones infectados. Antes de aplicarlo en casos personalizados de CaDuMa humano (cada paciente con su propio tumor), ponderaremos las dificultades y sus soluciones en un modelo experimental de CaDuMa murino inducido por medio de xenotrasplante de líneas celulares de origen humano y, por medio de la infección de ratones inmunocompetentes con el Virus del Polioma. _x000D_ _x000D_ El cáncer de la mama es una de las más frecuentes causas de muerte en las mujeres en la actualidad. Hay varios tipos de cáncer de la mama aunque el carcinoma ductal es el más frecuente en México y otros países, seguido por el adenocarcinoma y algunos sarcomas. En general, su tratamiento médico incluye la extirpación quirúrgica de la mama y ganglios de drenaje linfático del mismo lado, radiación local, quimioterapia, hormonoterapia en casos de tumores sensibles a esteroides sexuales (estrógenos y progesterona) y, en tiempos más recientes, algunos casos pueden financiar el elevado costo de la inmunidad pasiva por anticuerpos monoclonales contra antígenos tumorales. El pronóstico depende en gran medida del tipo histológico del tumor, de su invasividad y capacidad de diseminación remota (metástasis), de su respuesta a la inhibición de esteroides sexuales y, muy importantemente, del estadio de evolución (local, invasivo regional, sistémico) al tiempo de su diagnóstico. _x000D_ _x000D_ En los últimos diez años se han desarrollado modelos murinos de cáncer de mama. El cáncer de mama humano se caracteriza por una enorme diversidad biológica y, colectivamente, los nuevos modelos se han acercado mucho a abarcar esta diversidad. Han proporcionado una comprensión más profunda de los acontecimientos fundamentales que intervienen en la iniciación, desarrollo y progresión del cáncer y ofrecen nuevas oportunidades para desarrollar y probar estrategias para el tratamiento y, quizás, incluso prevenir la enfermedad._x000D_ _x000D_ La inoculación de líneas celulares de cáncer de mama como xenoinjertos ha permitido la investigación en un entorno “in vivo”, lo que incluye la compleja interacción tumor-estroma que facilita la formación y progresión del tumor. Muchos aspectos de la biología del cáncer de mama han sido investigados usando xenotrasplantes, incluyendo las alteraciones genéticas que contribuyen a la iniciación y crecimiento del tumor, la transducción de señales en la progresión tumoral, el papel del microambiente (interacciones entre la matriz extracelular y células tumorales, la inflamación y la angiogénesis y el proceso de varias etapas de la metástasis. La inhibición terapéutica con o sin modificación genética del crecimiento tumoral, producida por el xenotrasplante, también se ha estudiado con éxito._x000D_ _x000D_ Las líneas celulares de cáncer de mama humana (receptor a estrógeno positivas) más ampliamente utilizadas para estudios de xenoinjertos son MCF-7, T47D, ZR75 y BT-474, las cuales desarrollan los tumores en las glándulas mamarias de ratones desnudos en respuesta a la suplementación con estradiol. Sin embargo, estos tumores son poco invasivos y rara vez, si acaso, producen metástasis, aunque estas líneas celulares pueden ser modificadas genéticamente con el fin de aumentar su capacidad metastásica. Junto con las modificaciones genéticas, un notable progreso en la generación de modelos murinos ha significado el desarrollo de la cepa PyVT (de Polyomavirus Middle-Antigen por sus siglas en inglés), en el cual se desarrolla cáncer mamario progresivo. _x000D_ _x000D_ Nuestro proyecto contempla la utilización de dos modelos experimentales animales. El primer modelo está basado en el xenotransplante de líneas celulares a ratones BALB/c con el objetivo de generar anticuerpos contra estas células y poder analizar la variabilidad de la respuesta inmune del ratón contra estas células. El segundo modelo está basado en el estudio del cáncer en ratones PyVT, los cuales desarrollan cáncer mamario metastásico debido al oncogene viral “middle T“ del polyomavirus, con el objetivo de estudiar la variabilidad de la respuesta inmune durante el inicio, desarrollo, progresión y metastasis del cáncer de mama. _x000D_ _x000D_ El estudio de la diversidad inmunológica en la relación paciente/tumor (R-P/T) es rara vez explorada. No es descabellado pensar que siendo los individuos tan singularmente constituidos en su genoma e historia natural personal, estas R-P/Ts difícilmente pueden ser idénticas entre pacientes o animales experimentales. Y ni aun en un mismo paciente cabe el supuesto de una confrontación inmunológica estable a lo largo de la evolución de su enfermedad._x000D_ _x000D_ Queremos conocer la diversidad de los antígenos tumorales que son reconocidos por los anticuerpos de los sueros de ratones experimentalmente expuestos a antígenos de líneas celulares de cáncer de mama y también ratones con cáncer de mama experimentalmente inducido. Estamos interesados en saber si estos antígenos pueden estar relacionados directamente con la etapa del tumor y cuáles están presentes en todos los ratones, por lo que creemos que es importante identificar los antígenos tumorales para los que cada ratón desarrolla anticuerpos, lo que podría brindar grandes beneficios como el crear herramientas nuevas para el diagnóstico, pronóstico o tratamiento._x000D_ _x000D_ El objetivo principal de este proyecto de investigación es describir el perfil inmunológico (serología, citotoxicidad) característico de cada ratón confrontado ante líneas celulares de cáncer de mama y también con su propio tumor experimentalmente inducido y evaluar su posible diversidad entre los diferentes ratones y ante la evolución temporal de la R-P/T, con la expectativa de coadyuvar al diagnóstico y tratamiento personalizado en forma temprana, efectiva y costeable. _x000D_ _x000D_ El presente proyecto está dividido en tres etapas. La primera - en desarrollo - es el Montaje Técnico para medir la diversidad inmunológica individual expresada por imágenes en 2 dimensiones (2D) de las reacciones de anticuerpos séricos ante un conjunto complejo de antígenos cualquiera (2D-Inmunoblots). El segundo - por desarrollar- consiste en estudiar la diversidad de los anticuerpos séricos de ratones experimentalmente tratados con antígenos de líneas celulares y en un tumor mamario murino (ratones PyVT), a fin de identificar los antígenos más comúnmente percibidos en estos modelos experimentales. La tercera - por desarrollar- es evaluar en los sueros de estos ratones su actividad citotóxica mediada por Complemento contra las líneas celulares de carcinoma ductal de

El estudio de la respuesta inmune contra el cáncer ya establecido es impulsado por sus implícitas promesas de ser potencialmente útil para la detección, clasificación, pronóstico, tratamiento y prevención del cáncer. Hace falta más investigación para profundizar sobre su etiología, su vulnerabilidad a vacunas y/o a la administración de adyuvantes que dirijan la respuesta inmune a blancos más efectivos, para detectar más segura y tempranamente el surgimiento de las células cancerosas, para idear más efectivos e innocuos métodos de tratamiento a nivel de la expresión génica y/o de inmunidad pasiva humoral y/o celular.