Uno de los factores importantes en el desarrollo de la EA es la sobreproducción de del péptido amiloide-beta (Aβ). Estudios bioquímicos han establecido el incremento de algunas citocinas proinflamatorias en la regulación del procesamiento de la proteína precursora del amiloide (APP) y la generación de Aβ. _x000D_ Sin embargo, no se han realizado trabajos con astrocitos a nivel bioquímico y a nivel molecular, utilizando técnicas de imagenología, que demuestren el procesamiento amiloidogénico por la β y γ secretasas; así como el papel de citocinas proinflamatorias en favorecer dicho procesamiento. La vía amiloidogénica puede generar dos tipos de Aβ, uno de 40 aminoácidos y uno de 42 aminoácidos. Se sabe que las formas largas de Aβ son más propensas a la agregación rápida, oligomerización y a la generación de formas fibrilares, eventos que se piensa son críticos para el desarrollo de EA. Actualmente se conoce que el procesamiento endocítico de la APP, es aparentemente requerido para la generación de Aβ (Riddell et al., 2001; Ehehalt., 2003). Además del Aβ, la vía de procesamiento amiloidogénica genera un producto llamado AICD (APP intracellular C-terminal domains ~ 59 kDa). Este péptido ha sido difícil de estudiar por su tamaño y su vida media muy corta (Cupers y cols., 2001) y está tomando mucha importancia por estudios que demuestran su relación como factor de transcripción y como regulador de apoptosis y respuestas proinflamatorias (Chang y Suh, 2010)._x000D_ _x000D_ Existe evidencia de una respuesta inflamatoria en la EA que incluye cambios en la morfología de los astrocitos de ramificados (reposo) a ameboideos (activos) y astrogliosis manifestada por un incremento en el número, tamaño, y motilidad de los astrocitos.Más aún, la microglía activada en el cerebro de pacientes con EA son positivos para marcadores y mediadores pro-inflamatorios que incluye MHC clase II, Cox-2, MCP-1, TNF-α, IL-1β, and IL-6 (Akiyama et al.,2000). Además se han encontrado niveles aumentados de quimocinas y citocinas y sus receptores como IL-1α, CXCR2, CCR3, CCR5, and TGF-β,en cerebros post-mortem de pacientes con EA (Cartier et al., 2005)._x000D_ Varios factores ambientales o condiciones de daño interno pueden influir la respuesta inflamatoria que contribuye a la EA como varios de los antecedentes epidemiológicos descritos como el daño traumáticos, infecciones sistémicas y la dieta (Migliore and Coppede, 2009)._x000D_ Por lo tanto en el presente proyecto nos proponemos analizar el procesamiento amiloidogénico de la PPA en astrocitos primarios en cultivo y analizar las condiciones que propician la generación del amiloide-beta y el residuo activo AICD, como citocinas inflamatorias y el colesterol que relocaliza a la APP en balsas lipídicas para su procesamiento proteolítico._x000D_ _x000D_

La Enfermedad de Alzheimer es una enfermedad totalmente incapacitante para el que la padece y que requiere de cuidados constantes a todo lo largo de su evolución, que puede ser de años. A medida que la esperanza de vida aumenta están aumentando considerablemente los casos de EA, al punto de ser ya considerado un problema de salud pública. Se ha calculado que actualmente en el mundo existen casi 25 millones de pacientes._x000D_ A pesar de los grandes esfuerzos por entender la fisiopatología de esta enfermedad y tratar de desarrollar estrategias farmacológicas que la eviten, todavía no se cuenta con una cura o un tratamiento que frene su evolución._x000D_ Dado que en el cerebro de enfermos de Alzheimer se encuentra aumentado el péptido _x000D_ amiloide-beta que forma placas extracelulares amiloideas, mucho de los esfuerzos se han concentrado en analizar cómo se produce, sus mecanismos de neurotoxicidad, y las estrategias de protección farmacológica. Sin embargo hasta el momento varias de estas estrategias (inhibidores de gama-secretasas, vacunas antiamiloide, etc) han fracasado. Por tal motivo es importante profundizar el mecanismo de generación de este péptido que deriva de un procesamiento complejo de la proteína transmembranal llamada proteína precursora del amiloide. Esta proteína sufre cortes proteolíticos en varios sitios y por varias enzimas generando no solo el amiloide-beta, sino también otros fragmentos cuya contribución a la EA se desconoce cabalmente._x000D_ El procesamiento de la PPA se ha analizado con mayor detalle en neuronas pero se sabe que los astrocitos también poseen APP y que en condiciones de activación puede aumentar su metabolismo._x000D_ Siendo la respuesta inflamatoria un factor indudablemente asociado con la EA y habiendo pocos estudios sobre el papel de los astrocitos en el metabolismo de la PPA, el presente proyecto evaluará los mecanismos de generación de amiloide-beta y fragmentos como el AICD, en astrocitos en cultivo para contribuir al conocimiento del área y enfocar algunas estrategias de protección neuronal hacia la respuesta inflamatoria cerebral.